前言

溶瘤病毒（OV）具有感染、復(fù)制并溶解惡性轉(zhuǎn)化腫瘤細胞的能力。這種溶瘤活性增強了治療優(yōu)勢，并誘導(dǎo)腫瘤細胞死亡后的免疫原性，使CD8＋T細胞向腫瘤微環(huán)境的浸潤增加。溶瘤病毒的這一重要特征可使免疫“冷”腫瘤升溫，其與其它免疫療法相結(jié)合呈現(xiàn)出誘人的前景。

溶瘤病毒

溶瘤病毒作為抗癌藥物得到廣泛的開發(fā)，基于腺病毒、單純皰疹病毒、呼腸孤病毒、痘苗病毒、麻疹病毒、柯薩奇病毒和新城疫病毒的OV已證明在動物模型上的療效和安全性，一些OV正在進行臨床試驗。

OV主要通過感染并選擇性殺傷腫瘤細胞和誘導(dǎo)全身抗腫瘤免疫的雙重作用機制實現(xiàn)抗腫瘤效果。其中嚴格控制腫瘤選擇性是一個關(guān)鍵考慮因素，健康細胞攝取OV會使其流向“非靶向”組織，從而限制OV用于腫瘤靶向的生物利用度。近年來，隨著“精確病毒療法”的發(fā)展，OV在實現(xiàn)更嚴格的腫瘤選擇性方面了重大進展。

此外，溶瘤病毒的另一個吸引人的特征是病毒基因組編碼治療性轉(zhuǎn)基因的能力。早期研究集中于對腫瘤細胞具有間接毒性的轉(zhuǎn)基因，如硝基還原酶。但由于多種原因，包括載體的轉(zhuǎn)染／轉(zhuǎn)導(dǎo)效率低、非特異性毒性和前藥－藥物轉(zhuǎn)化率慢等，療效有限。目前，研究更多的集中在加入編碼細胞因子（如IL－12、IL－2、IL－15和GM－CSF）的轉(zhuǎn)基因，以刺激免疫細胞向腫瘤微環(huán)境（TME）的募集。FDA和EMA已經(jīng)批準了talimogene laherparepvec（T－VEC，Imlygic?），一種表達GM－CSF的改良單純皰疹病毒（HSV），用于惡性黑色素瘤的局部治療，表明了它們的潛力。

然而，OV作為單一療法療效依然有限，而OV誘導(dǎo)腫瘤細胞死亡釋放免疫原性對于其它免疫療法具有重要意義�；�于此，OVs已與其它免疫療法聯(lián)合使用，以進一步刺激宿主抗腫瘤免疫反應(yīng)。

OV與免疫檢查點抑制劑

免疫檢查點，尤其是細胞毒性T淋巴細胞相關(guān)蛋白4（CTLA－4）和程序性細胞死亡蛋白1（PD－1），是維持外周耐受和調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)穩(wěn)態(tài)的關(guān)鍵組成部分。盡管ICIs的治療潛力已經(jīng)充分展示，但能夠從這種治療中獲益的人群百分比仍然很低。在這種情況下，溶瘤病毒可能提供顯著的免疫增強效果。

臨床前研究已證明OV mJX‐594能夠使ICI耐藥腫瘤致敏，并促進小鼠腫瘤中的T細胞浸潤，與抗PD‐1治療聯(lián)合，可將腫瘤生長降低70％。類似地，另一項研究證明，與單獨使用抗CTLA－4治療的小鼠相比，使用NDV和抗CTLA－4聯(lián)合治療時，對腫瘤復(fù)發(fā)的保護加倍，并增強腫瘤淋巴細胞浸潤。

類似的結(jié)果也在人體試驗中得到了證實。在治療IIB－IV期黑色素瘤的臨床試驗期間，研究了接受T－VEC和治療ipilimumab的患者的免疫反應(yīng)，與ipilimumab單藥治療觀察到的有限反應(yīng)相比，聯(lián)合治療證明增加的CD4＋ICOS＋T細胞與顯著改善的治療結(jié)果相關(guān)。OVs與ICIs的潛在協(xié)同作用已使其在臨床試驗中的聯(lián)合應(yīng)用廣受歡迎，目前正在對多種組合進行評估。

另外，溶瘤病毒是增加腫瘤部位局部產(chǎn)生的抗體的優(yōu)秀候選者。OVs轉(zhuǎn)基因編碼ICI抗體已進入臨床評估。雖然數(shù)量有限，但隨著技術(shù)的進步，進入臨床試驗的數(shù)量肯定會迅速增加。

OV與CAR－T細胞

嵌合抗原受體（CAR）T細胞，已經(jīng)在血液系統(tǒng)惡性腫瘤方面也取得了顯著的成功。然而，由于TME對CAR－T細胞的運輸和滲透的抑制，以及目前在實體瘤中缺乏優(yōu)秀的靶點，導(dǎo)致其在實體瘤的治療功效有限。

然而，最近的研究利用了獨特設(shè)計的OV，在受感染的腫瘤細胞上表達截斷形式的CD19，將這些細胞“標記”出來，以有利于CD19－CAR－T細胞對腫瘤細胞的殺傷，這增加了T細胞的腫瘤浸潤，提高了小鼠黑色素瘤和結(jié)直腸癌模型的存活率。

此外，也有人探索使用CAR－T細胞作為OV載體，使病毒定向到腫瘤細胞中。這些例子表明OV對于CAR－T治療也可以提供額外的益處。

OV與雙特異性抗體

雙特異性抗體T細胞導(dǎo)向療法通過結(jié)合CD3／CD16或腫瘤特異性抗原，激活T細胞或NK細胞，導(dǎo)致腫瘤細胞裂解。雙特異性抗體藥物已經(jīng)在臨床前和臨床上取得了成功，目前成為研究最火熱的領(lǐng)域之一。

盡管如此，雙特異性抗體依然受到毒性、半衰期、腫瘤部位滯留能力以及無法產(chǎn)生持久免疫記憶的限制。為了應(yīng)對這種情況，人們開發(fā)了一種溶瘤腺病毒（ICOVIR－15K），該病毒被設(shè)計為可表達靶向EGFR的BiTE（cBITE）。在共培養(yǎng)試驗中，溶瘤作用導(dǎo)致T細胞活化、增殖，并增強了細胞毒性。ICO15K－cBITE被證明具有腫瘤選擇性，與親代病毒相比，瘤內(nèi)注射增加了體內(nèi)腫瘤浸潤性T細胞的持續(xù)性和累積性，在動物模型中表現(xiàn)出增強的抗腫瘤活性。

另一個例子是表達成纖維細胞激活蛋白（FAP）靶向的BiTE（fBiTE）的溶瘤病毒。通過這種方法，將免疫細胞重定向至腫瘤基質(zhì)成纖維細胞，以改善腫瘤的通透性，并有助于病毒擴散。

雙特異性抗體的一種新形式是免疫動員抗腫瘤單克隆TCR（ImmTACs），它利用TCR特異性與靶細胞結(jié)合。一般的雙特異性抗體受到細胞表面抗原識別的限制，相比之下，IMMTAC能夠通過人類白細胞抗原（pHLA）提供的肽片段識別細胞內(nèi)抗原。盡管目前關(guān)于ImmTACs與OV聯(lián)合應(yīng)用的數(shù)據(jù)有限，但OV的ImmTACs在腫瘤特異性表達可能在提高效力和降低毒性方面具有顯著優(yōu)勢。

此外，溶瘤病毒可以很容易地被設(shè)計成不同免疫療法的聯(lián)合，包括BiTE、細胞因子和ICIs。CAdTrio是一種編碼IL－12、抗PD－L1抗體和針對CD44v6的特異性BiTE的腺病毒，與HER－2－CAR －T細胞聯(lián)合應(yīng)用，在小鼠動物模型中，顯著改善了腫瘤的控制和存活率。

小結(jié)

大量的證據(jù)表明OVs和其它免疫療法具有協(xié)同作用的潛力，無論是作為聯(lián)合療法還是作為轉(zhuǎn)基因到OV的基因組內(nèi)。目前有越來越多的OV與免疫療法的組合出現(xiàn)在臨床前和臨床的研究階段，但是鑒于存在多種OV類型、靶向策略以及免疫殺傷手段，找到這種聯(lián)合療法的優(yōu)化組合仍然是一項挑戰(zhàn)。相信隨著臨床研究的不斷深入，OV將帶給腫瘤免疫療法的更多的可能性和更美好的前景。

參考文獻：

1．Pouring petrol on the flames：Using oncolytic virotherapies to enhance tumour immunogenicity．Immunology． 2021 Aug； 163（4）： 389–398．