前言

蛋白藥物具有誘導(dǎo)免疫原性的潛力，其后果可能影響療效甚至危及生命。生物治療的新模式，如抗體偶聯(lián)藥物（ADC）、融合蛋白和聚乙二醇化都會(huì)攜帶非天然的人類蛋白質(zhì)序列和／或結(jié)構(gòu)基序，可能增加其免疫原性風(fēng)險(xiǎn)。因此，需要全面的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、策略和分析來(lái)監(jiān)測(cè)和表征ADC和其他生物治療的免疫原性，以預(yù)測(cè)和了解潛在的臨床效果。

ADC由單克隆抗體（mAb）通過(guò)穩(wěn)定的連接物共價(jià)連接到細(xì)胞毒性劑，其結(jié)合了單抗對(duì)腫瘤細(xì)胞表面靶抗原的特異性和細(xì)胞毒性藥物的高效性。雖然目前的ADC使用人源或人源化的單抗和小分子有效載荷，但與治療性單抗相比，其半抗原樣結(jié)構(gòu)可能會(huì)增加其免疫原性潛力。

抗藥物抗體（ADAs）可以針對(duì)ADC中的不同結(jié)構(gòu)域，如mAb表位、mAb新表位、接頭和細(xì)胞毒性劑。如果大的ADC－ADA免疫復(fù)合物被非靶向免疫細(xì)胞攝取而導(dǎo)致細(xì)胞死亡，則抗細(xì)胞毒性劑的ADAs存在潛在的安全風(fēng)險(xiǎn)。

人們普遍認(rèn)為，評(píng)估生物治療藥物免疫原性所遵循的行業(yè)慣例和監(jiān)管指南可適用于ADC。ADC免疫原性評(píng)估的關(guān)鍵是風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、適當(dāng)?shù)臋z測(cè)和ADA結(jié)構(gòu)域特異性的附加特征。免疫原性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估包括與患者和產(chǎn)品相關(guān)的各種已知因素，這些因素可能影響到藥物的免疫原性以及免疫反應(yīng)的潛在后果。對(duì)于ADC，該風(fēng)險(xiǎn)通常被認(rèn)為高于治療性單抗。

基于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，這里對(duì)在11個(gè)臨床試驗(yàn)中對(duì)8個(gè)ADC藥物進(jìn)行了免疫原性數(shù)據(jù)分析，這些臨床試驗(yàn)涉及一系列實(shí)體腫瘤和血液學(xué)腫瘤適應(yīng)癥。對(duì)于每個(gè)ADC，基線時(shí)ADA的發(fā)生率、治療后的發(fā)生率和免疫反應(yīng)的其他特征進(jìn)行了評(píng)估。

ADAs基線發(fā)生率

從所有ADC研究中獲得的ADAs數(shù)據(jù)的基線發(fā)生率來(lái)看， ADAs的基線發(fā)生率在1．4％到8．1％之間，這處于其他單克隆抗體衍生生物療法報(bào)告的范圍內(nèi)，包括ADC藥物Kadcyla。                    

在這8個(gè)ADC抗體的臨床研究中，這些抗體不太可能與ADC的其他成分有關(guān)。此外，在所評(píng)估的8個(gè)ADC中，未經(jīng)治療的患者群體樣本中的背景信號(hào)與來(lái)自健康志愿者的混合血清對(duì)照信號(hào)相似。

ADC治療后ADAs的發(fā)生率

基線后ADAs的發(fā)生率在0到35．8％之間，以血液腫瘤為靶點(diǎn)的ADC患者比以實(shí)體瘤為靶點(diǎn)的ADA患者要少，總共169例中有8例，而實(shí)體瘤459例中有83例，這可以歸因于血液腫瘤患者的免疫殺傷。

然而，ADA的發(fā)生率也有一些例外，例如ADC C靶向漿細(xì)胞的ADA發(fā)生率為25．9％，而黑色素瘤的ADC G發(fā)生率為0％，但患者接受糖皮質(zhì)激素作為治療的一部分，具有已知的免疫抑制作用。

對(duì)ADC A和I也進(jìn)行了一些研究， ADC A只在一項(xiàng)研究中只有一名患者出現(xiàn)了治療誘導(dǎo)的ADA。而關(guān)于ADC I，研究中ADA陽(yáng)性患者的數(shù)量在5到18之間，相應(yīng)的ADA發(fā)生率在20．8％到32．0％之間。此外，但值得注意的是，在I期研究中，卵巢癌患者ADA發(fā)生率高于肺癌患者，分別為31．0％（9／29）和16．4％（9／55）。在II期研究中，卵巢癌患者也觀察到ADA發(fā)生率相似。

TMB作為生物標(biāo)記物的應(yīng)用與挑戰(zhàn)

對(duì)于在這里評(píng)估的八個(gè)ADC，大多數(shù)ADA是針對(duì)ADC的mAb結(jié)構(gòu)域，范圍在86％到100％之間。這些結(jié)果與Adcetris（brentuximab－vedotin）的結(jié)果相似，Adcetris與本文介紹的八種ADC具有相同的接頭和毒性藥物。

總的來(lái)說(shuō)，這些數(shù)據(jù)表明，與傳統(tǒng)的治療性單克隆抗體相比，在大多數(shù)患者中，這些ADC的半抗原樣結(jié)構(gòu)似乎不會(huì)增加其免疫原性風(fēng)險(xiǎn)。

至于ADA水平，這些ADC的總滴度范圍很廣，從小于1．30到4．92滴度單位，所有ADC的平均滴度超過(guò)2．50滴度單位。

對(duì)于治療誘導(dǎo)的ADA發(fā)生時(shí)間，顯示ADAs的發(fā)生在所有ADC中是可變的，ADA發(fā)生的時(shí)間范圍在3到42周之間。此外，8個(gè)ADC中的6個(gè)在開始治療后3到6周內(nèi)有60％以上的患者出現(xiàn)ADAs。                  

所有ADC的大多數(shù)應(yīng)答都是持續(xù)的，ADC H和I的瞬時(shí)應(yīng)答最高（分別為43．8％和34．1％）。然而，在腫瘤學(xué)研究中將ADA反應(yīng)分為持續(xù)性或短暫性可能會(huì)產(chǎn)生誤導(dǎo)，因?yàn)橹委煏r(shí)間通常較短。事實(shí)上，對(duì)ADA陽(yáng)性反應(yīng)的更詳細(xì)的數(shù)據(jù)評(píng)估表明，三個(gè)ADC（ADC F、H和I）的ADA陽(yáng)性率較高。

652例患者中有33例在基線檢查時(shí)已有抗體，其中3例ADA反應(yīng)增強(qiáng)。這三名患者的ADA滴度隨時(shí)間變化， 基線滴度在1．89到2．71之間，而基線后滴度在2．50到4．10之間。3名患者中有2名在治療后的第一個(gè)基線后時(shí)間點(diǎn)出現(xiàn)ADA峰值，出現(xiàn)增強(qiáng)反應(yīng)的時(shí)間范圍為3至9周。所有患者最后一個(gè)時(shí)間點(diǎn)的ADA水平均低于峰值水平。ADA結(jié)構(gòu)域特異性在基線和基線后時(shí)間點(diǎn)保持不變。

ADA對(duì)其它臨床數(shù)據(jù)的影響

免疫原性是蛋白藥物臨床特征的重要組成部分，其數(shù)據(jù)應(yīng)在其他因素（如療效、PK和安全性）的背景下進(jìn)行評(píng)估。這里我們集中在產(chǎn)生ADA的患者數(shù)量較高的三個(gè)ADC，即ADC F、H和I，分別有19、16和43名基線后ADA陽(yáng)性反應(yīng)的患者。

ADC F的ADAs的發(fā)生率為35．8％（19／53），18例患者為治療誘導(dǎo)型ADAs，1例為治療增強(qiáng)型ADAs�？偟膩�(lái)說(shuō)，與沒(méi)有產(chǎn)生ADC F抗體的患者相比，在PK、安全性或療效結(jié)果方面沒(méi)有觀察到差異。此外，ADA滴度對(duì)這些患者的PK有影響，但先前在食蟹猴中已有報(bào)告。

至于ADC－H，ADAs的發(fā)生率為25％（16／64），所有16例患者都有治療誘導(dǎo)的ADAs。與ADCF相似，一些ADA滴度較高的患者的總抗體波谷水平低于ADA滴度較低的患者，但總的ADA滴度較高的患者與總抗體水平較低的患者并不對(duì)應(yīng)。

ADCⅠ共有43例患者出現(xiàn)ADAs，41例患者誘導(dǎo)，2例患者增強(qiáng)。值得注意的是，7名患者（包括2名ADAs增強(qiáng)患者）在一個(gè)或多個(gè)低谷時(shí)間點(diǎn)的總抗體水平低于檢測(cè)水平。但仍需要進(jìn)行全面的分析才能得出結(jié)論：ADA滴度對(duì)這些患者的PK有影響。然而，值得注意的是，高ADA滴度值（?4．00）對(duì)食蟹猴trastuzumab ADC的PK曲線有顯著影響。

從已上市ADC獲得的有限數(shù)據(jù)表明，ADAs對(duì)臨床結(jié)果的影響很小。Adcetris有37％的ADAs發(fā)生率，持續(xù)陽(yáng)性ADAs患者的輸液反應(yīng)頻率較高，導(dǎo)致兩名患者停止治療。ADAs與Kadcyla的發(fā)生率為5．3％，ADA的發(fā)展似乎對(duì)安全性、PK和療效沒(méi)有影響。在一期研究中，Mylotarg有一些ADA陽(yáng)性患者，其中一例出現(xiàn)了與ADAs相關(guān)的短暫性呼吸急促。在目前推薦的劑量方案下，臨床試驗(yàn)中未生成Mylotarg的額外免疫原性數(shù)據(jù)。在Besponsa的臨床試驗(yàn)中，ADAs的發(fā)生率為3％，對(duì)ADC的清除率沒(méi)有影響。

小結(jié)

在11個(gè)臨床試驗(yàn)的廣泛的腫瘤適應(yīng)癥中，8個(gè)vc－MMAE－ADC的ADAs發(fā)生率在0－35．8％之間。大多數(shù)ADA反應(yīng)是針對(duì)ADC中的mAb結(jié)構(gòu)域，這表明半抗原樣結(jié)構(gòu)在產(chǎn)生針對(duì)這些ADC的免疫應(yīng)答中只起了非常小的作用。這些結(jié)果強(qiáng)化了這樣的事實(shí)，即分子結(jié)構(gòu)是生物療法免疫反應(yīng)的一個(gè)重要因素，但不是唯一的因素。

盡管這里的8個(gè)vc－MMAE－ADC的數(shù)據(jù)表明，隨著項(xiàng)目進(jìn)入臨床開發(fā)的后期階段，風(fēng)險(xiǎn)可能會(huì)降低，但是對(duì)于可能使用不同的接頭和更強(qiáng)力的細(xì)胞毒性藥物的新型ADC，仍然建議采用保守的方法。此外，隨著預(yù)測(cè)性免疫原性工具的使用越來(lái)越普遍，它們將提供額外的信息，以納入ADC和新型治療方式的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和免疫原性策略中。

參考文獻(xiàn)：

1．Immunogenicity of antibody－drug conjugates： observations across 8molecules in 11 clinical trials． Bioanalysis． 2019 Sep；11（17）：1555－1568．

       原文標(biāo)題 : ADC藥物的免疫原性