研究人員設(shè)計(jì)了一種CAR－147的結(jié)構(gòu)，它由靶向人HER2的單鏈抗體、IghG1的鉸鏈區(qū)和小鼠CD147分子的跨膜和細(xì)胞內(nèi)區(qū)域組成。CAR－147與HER2＋人乳腺癌細(xì)胞共培養(yǎng)后，在CAR－147巨噬細(xì)胞中誘導(dǎo)多個(gè)MMP的表達(dá)，證明CAR－147能特異性識(shí)別HER2抗原，有效激活巨噬細(xì)胞中MMP的表達(dá)。CAR－147巨噬細(xì)胞在體外不抑制腫瘤細(xì)胞增殖，但靜脈注射CAR－147巨噬細(xì)胞可顯著抑制4T1乳腺癌小鼠模型的腫瘤生長(zhǎng)。同時(shí)發(fā)現(xiàn)用CAR－147巨噬細(xì)胞治療的腫瘤中T細(xì)胞所占的比例遠(yuǎn)高于對(duì)照巨噬細(xì)胞治療的腫瘤，說(shuō)明CAR－147巨噬細(xì)胞能破壞腫瘤細(xì)胞外基質(zhì)，促進(jìn)T細(xì)胞向腫瘤浸潤(rùn)。

CAR－M治療實(shí)體瘤的臨床應(yīng)用

直到2020年11月，兩個(gè)基于CAR－M策略的臨床試驗(yàn)已經(jīng)獲得FDA的批準(zhǔn)。第一個(gè)是來(lái)自CARISMA Therapeutics的候選藥物CT－0508，它用抗HER2的CAR－M治療復(fù)發(fā)／難治性HER2過(guò)度表達(dá)的腫瘤患者（I期臨床試驗(yàn)）。另一個(gè)是Maxyte的MCY－M11，它利用mRNA轉(zhuǎn)染PBMC表達(dá)靶向間皮素的CAR（包括CAR－M），治療復(fù)發(fā)／難治性卵巢癌和腹膜間皮瘤患者，目前正在招募志愿者進(jìn)行I期臨床試驗(yàn)。

關(guān)于CAR－M的臨床轉(zhuǎn)化，有幾個(gè)方面需要注意：第一，CAR－M的安全性和有效性是該療法的基礎(chǔ)，雖然已經(jīng)通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了驗(yàn)證，但CAR－M在人體內(nèi)的安全性和有效性仍有待驗(yàn)證；其次，可靠的細(xì)胞來(lái)源和擴(kuò)增是CAR－M臨床應(yīng)用的必要條件，CAR－M可由PBMC或iPSCs制備。此外，與T細(xì)胞不同，巨噬細(xì)胞發(fā)生GVHD的風(fēng)險(xiǎn)較低，這意味著可以提前生產(chǎn)產(chǎn)品，供患者按需使用。第三，還有一個(gè)問(wèn)題必須考慮，目前，CAR－M多采用病毒轉(zhuǎn)染的方法，可能會(huì)誘發(fā)插入突變， CRISPR／Cas9為解決這一問(wèn)題提供了新的可能性，僅需一周即可完成CAR－T基因的編輯。

CAR－M的優(yōu)勢(shì)與挑戰(zhàn)

與CAR－T和CAR－NK細(xì)胞相似，CAR－M細(xì)胞由識(shí)別特定腫瘤抗原的細(xì)胞外信號(hào)傳導(dǎo)域、跨膜區(qū)域和細(xì)胞內(nèi)激活信號(hào)區(qū)域組成。目前，對(duì)細(xì)胞外信號(hào)域的研究主要幾種在幾種常見(jiàn)的腫瘤靶點(diǎn)，如CD19和HER2。

與CAR－T細(xì)胞不同，CAR－M細(xì)胞具有以下三個(gè)優(yōu)點(diǎn)。

1）由于腫瘤細(xì)胞周圍基質(zhì)形成的物理屏障，T細(xì)胞不能進(jìn)入腫瘤環(huán)境，而巨噬細(xì)胞可以明顯地浸入腫瘤環(huán)境中。TAM在腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移、免疫抑制和血管生成中起著重要作用。CAR－M能降低TAM的比例，影響TAM的細(xì)胞表型，對(duì)腫瘤的治療有積極作用。

2）CAR－M除了具有吞噬腫瘤細(xì)胞的作用外，還具有促進(jìn)抗原提呈能力和增強(qiáng)T細(xì)胞殺傷的作用。

3）與CAR－T相比，CAR－M的循環(huán)時(shí)間有限，非腫瘤靶向毒性較小。

盡管CAR－M有很大的潛力成為一種強(qiáng)有力的腫瘤免疫治療方法，但要達(dá)到預(yù)期的效果還需要克服許多問(wèn)題。首先是細(xì)胞數(shù)量的限制：無(wú)論是在體外還是在體內(nèi)注射后，巨噬細(xì)胞都不會(huì)增殖。患者只能接受有限數(shù)量的巨噬細(xì)胞，這可能會(huì)影響治療效果。二是與巨噬細(xì)胞在體內(nèi)的遷移特性有關(guān)。注射后，外源性巨噬細(xì)胞通過(guò)肺部，然后大部分留在肝臟，不利于癌癥的治療。三是復(fù)雜的腫瘤微環(huán)境。盡管CAR－M在小鼠模型中取得了很好的效果，但人類實(shí)際的腫瘤微環(huán)境要比動(dòng)物模型復(fù)雜得多。最后，由于腫瘤細(xì)胞的高度異質(zhì)性，靶抗原的表達(dá)可能不夠。這一問(wèn)題在CAR－T治療中一直非常突出。臨床研究發(fā)現(xiàn)，大多數(shù)被CAR－T細(xì)胞去除的腫瘤細(xì)胞都有高水平的靶抗原表達(dá)�？梢灶A(yù)見(jiàn)，這也將成為CAR－M療法發(fā)展的一大障礙。

小結(jié)

CAR－M療法在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中已顯示出其有效的抗腫瘤能力。與CAR－T和CAR－NK相比，CAR－M作為一種新的細(xì)胞免疫療法有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，但也有許多不足需要克服。因此，在今后的臨床治療中應(yīng)注意最大限度地提高CAR－M的有效性和安全性。我們有理由相信，隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展，CAR－M很快將在患者身上顯示出療效，為腫瘤免疫治療再添助力！

參考文獻(xiàn)：

1．CAR－macrophage： A newimmunotherapy candidate against solid tumors． Biomed Pharmacother． 2021 Jul；139：111605